Ki pi tandans HPLC echèk ak solisyon yo

Kòm yon enstriman wo-presizyon, HPLC ka fasilman mennen nan kèk pwoblèm anbarasan ti si li pa opere nan fason ki kòrèk la pandan w ap itilize.Youn nan pwoblèm ki pi komen yo se pwoblèm konpresyon kolòn.Ki jan yo byen vit rezoud pwoblèm yon chromatograph defo.Sistèm HPLC a sitou konsiste de yon boutèy rezèvwa, yon ponp, yon piki, yon kolòn, yon chanm tanperati kolòn, yon detektè ak yon sistèm pwosesis done.Pou tout sistèm nan, poto yo, ponp ak detektè yo se eleman kle yo ak kote prensipal yo ki gen tandans fè pwoblèm.

Kle a presyon kolòn se zòn nan ki bezwen anpil atansyon lè w ap itilize HPLC.Estabilite nan presyon kolòn se pre relasyon ak fòm pik kwomatografik, efikasite kolòn, efikasite separasyon ak tan retansyon.Estabilite presyon kolòn pa vle di ke valè presyon an estab nan yon valè ki estab, men pito ke ranje a fluctuation presyon se ant 345kPa oswa 50PSI (ki pèmèt pou itilize nan elisyon gradyan lè presyon an kolòn se ki estab epi tou dousman chanje).Presyon twò wo oswa twò ba se yon pwoblèm presyon kolòn.

Ki pi tandans HPLC echèk ak solisyon yo

1, presyon ki wo se pwoblèm ki pi komen nan itilizasyon HPLC.Sa vle di yon ogmantasyon toudenkou nan presyon.An jeneral, gen rezon sa yo: (1) An jeneral, sa a se akòz blokaj kanal koule.Nan pwen sa a, nou ta dwe egzamine li an moso.a.Premyèman, koupe inlet ponp vakyòm lan.Nan pwen sa a, tib PEEK la te ranpli ak likid pou tib PEEK la te pi piti pase boutèy sòlvan an pou wè si likid la te koule nan volonte.Si likid la pa koule oswa koule tou dousman, tèt filtre sòlvan an bloke.Tretman: Tranpe nan 30% asid nitrique pou yon demi èdtan epi rense l avèk dlo ultrapur.Si likid la gout owaza, tèt filtre sòlvan an nòmal epi yo tcheke;b.Louvri valv la Purge pou faz mobil lan pa pase nan kolòn nan, epi si presyon an pa siyifikativman redwi, tèt la filtre blan bloke.Tretman: Whiteheads filtre yo te retire ak sonike ak 10% isopropanol pou demi èdtan.Sipoze presyon an desann anba a 100PSI, tèt blan filtre a nòmal epi yo tcheke;c.Retire fen kolòn nan sòti, si presyon an pa diminye, kolòn nan bloke.Tretman: Si se yon blokaj sèl tanpon, rense 95% jiskaske presyon an nòmal.Si obstak la ki te koze pa kèk materyèl ki pi byen konsève, yo ta dwe itilize yon koule pi fò pase faz mobil aktyèl la pou kouri nan direksyon presyon nòmal.Si presyon netwayaj alontèm la pa diminye dapre metòd ki pi wo a, yo ka konsidere inlet la ak priz kolòn nan konekte ak enstriman an okontrè, epi yo ka netwaye kolòn nan ak faz mobil lan.Nan moman sa a, si presyon an kolòn toujou pa redwi, plak la Van antre kolòn ka sèlman ranplase, men yon fwa operasyon an pa bon, li fasil mennen nan rediksyon nan efè kolòn, kidonk eseye sèvi ak mwens.Pou pwoblèm difisil, yo ka konsidere ranplasman kolòn.

(2) Anviwònman ki pa kòrèk koule: Yo ka reset pousantaj koule kòrèk.

(3) Move rapò koule: endèks viskozite diferan pwopòsyon koule diferan, ak presyon sistèm korespondan koule a ak pi wo viskozite tou pi gwo.Si sa posib, solvang viskozite pi ba yo ka ranplase oswa re-mete epi prepare.

(4) Presyon sistèm zewo drift: ajiste zewo nan Capteur nivo likid la.

2, presyon an twò ba (1) anjeneral ki te koze pa flit sistèm.Kisa pou w fè: Jwenn chak koneksyon, espesyalman koòdone nan tou de bout kolòn nan, epi sere boulon zòn nan koule.Retire pòs la epi sere boulon oswa liy fim nan PTFE ak fòs apwopriye.

(2) gaz la antre nan ponp lan, men presyon an anjeneral enstab nan moman sa a, segondè ak ba.Plis seryezman, ponp lan pa pral kapab absòbe likid la.Metòd tretman: louvri valv netwayaj la epi netwaye nan yon pousantaj koule nan 3 ~ 5ml / min.Si se pa sa, bul lè yo te aspire nan tiyo echapman an lè l sèvi avèk yon tib zegwi dedye.

(3) Pa gen ekoulman faz mobil: tcheke si gen yon faz mobil nan boutèy rezèvwa a, si koule a benyen nan faz mobil la, epi si ponp lan ap kouri.

(4) Valv referans la pa fèmen: valv referans la fèmen apre ralantisman.Li anjeneral desann nan 0.1.~ 0.2mL / min apre yo fin fèmen valv referans la.

Rezime:

Nan papye sa a, yo analize sèlman pwoblèm komen nan kromatografi likid.Natirèlman, nan aplikasyon pratik nou an, nou pral rankontre plis lòt pwoblèm.Nan manyen fòt, nou ta dwe swiv prensip sa yo: sèlman chanje yon faktè nan yon moman pou detèmine relasyon ki genyen ant faktè ipotetik la ak pwoblèm nan;Anjeneral, lè ranplase pati pou depanaj, nou ta dwe peye atansyon a mete pati yo entak demoute tounen an plas pou anpeche fatra;Fòme yon bon abitid dosye se kle nan siksè nan manyen fay.An konklizyon, lè w ap itilize HPLC, li enpòtan pou peye atansyon sou echantiyon pre-tretman ak bon operasyon ak antretyen nan ekipman an.